科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄植株的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长.质粒上有Pst I、Sma I、Hind III、Alul 等四种限制酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr 为抗氨苄青霉素基因),其中①-④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,I、II 表示相关结构或细胞.请据图作答:
(l)基因工程的核心是______.
(2)构建基因表达载体时,可用一种或多种限制酶进行切割.为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用______酶,分别对目的基因和质粒进行切割,切割后产生的DNA 片段分别为______种和______ 种.
(3)要筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应首先选择含______的培养基中筛选番茄组织细胞.
(4)研究人员通常采用______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.
(5)基因工程操作中的第四步是目的基因的检测与鉴定,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用______技术,.采用______ 方法在个体生物学水平上检测目的基因是否表达.
(6)图中③④分别指的是______、______,欲获得人工种子应培养到______阶段.将II细胞培养成完整植物体所用技术的理论基础是______.
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