三穗县示范幼儿园的前身是三穗县机关幼儿园。县机关幼儿园创建于1952年春，园长李琳筠。园址设在今县新华书店处，招收机关职工幼儿50名，分中、小各1班，配教师1人，保育员1人。1954年秋，并入八弓小学为附设幼儿班。1957年秋，从八弓小学分出建立机关保育院，院址在今农业局内，招收幼儿150人，分大、中、小班和1个托儿班，配教职员工31人（其中正副院长3人，教师6人，保育员22人）。1961年，在国民经济贯彻“调整、巩固、充实、提高”八字方针期间，农村幼儿园、托儿所先后全部解散，县机关保育院又改为机关幼儿园，再次并入八弓小学为附设幼儿班。随着国民经济好转，1965年恢复县机关幼儿园。1966至1976年文化大革命期间，县机关幼儿园停办。粉碎“四人帮”后，幼儿教育工作得到恢复。1977年，又恢复县机关幼儿园，园长何瑞香，园址在原县人委砖木结构的办公大楼内（今电力局职工宿舍）。1981年县机关幼儿园属县妇联管理，园长周曼珍。1982年，吴昭柳任园长。1983年起，王玉梅任园长。1987年8月，根据《国务院办公厅转发国家教委等部门关于明确幼儿教育事业领导管理职责分工请示》精神，县教育局接管了全县幼教领导管理工作。1988年，将县机关幼儿园更名为“三穗县示范幼儿园”。1989年州补助4万元，县示范幼儿园自筹0.5万元，县教育局投资4万元，共8.5万元，征地修建县示范幼儿园。园址在今县国税局与县供销楼之间，占地面积660平方米，建筑面积443.47平方米，二楼一底6个教室、4个幼儿休息室。1994年4月至2000年，安莉担任副园长、园长。2001年，刘益芬任代理园长，2002年起任园长。
三穗县示范幼儿园，2007年在园幼儿273人，最多时达到310人，开设6个班，其中3个双语班。在园教职工22人，其中正式教师17人，正式炊事员2人，聘请3人。教师学历大专15人，中专2人；小教高级职称11人，小教一级职称6人。幼儿园使用全国通用幼儿教材课本，开设有语言、数学、自然、社会与健康、美工、做与玩手工制作等课程。教学设备有教玩具柜、录音机、手风琴、钢琴、脚踏风琴、打击乐器、桌面玩具（向日葵拼花、智力积木、智力教具箱、塑料拼塔图、七色花积木、七巧板积木、水果、小穿线板、工人工具箱等）、户外玩具（幼儿游戏钻洞、篮球架、独木桥、大球、幼儿沙水盘、滑滑梯、大型玩具）。
县示范幼儿园是全县唯一一所国家开办的幼儿园，1988年后直属县教育局管理，幼儿园实行园长负责制。在管理上以科学化、规范化、制度化的管理模式为办园目标，制订有《教师管理制度》、《教师工作日“八不准”》、《说普通话制度》、《代课管理制度》、《园长职责》、《教师工作职责》、《安全管理制度》、《卫生管理制度》、《传染病疫情报告管理制度》、《除“四害”措施》等。在教学上坚持自己的办园特色，多以游戏的形式对幼儿进行教学，注意发挥幼儿动手、动脑、动口的能力，在丰富多彩的活动中使幼儿在体、智、德、美诸方面得到健康和谐发展，做到保中有教、教中有保、保教结合、保教并重。在教学过程中，根据幼儿的爱好、兴趣，开设特色班，使幼儿在特色班里学到许多东西。如美工班的幼儿会熟练地用剪刀剪图形、剪花，用针绣图案等；舞蹈班的幼儿能随音乐自跳自舞；趣味识字班的幼儿能认识许多字，并能组词。2004年起，开展“双语”（汉语、英语）教学，深受家长赞喜。
三穗县示范幼儿园在2000年、2002年参加全州幼儿教师优质课比赛中分别获三等奖和二等奖；2001年参加全县“六一”申奥添光彩和县妇联举办的“蓝天、白云文艺比赛”中分别荣获一等奖；2002年“三八”妇女节健身操比赛获一等奖，全民健身比赛幼儿组织织奖；2004年参加县全民健身操比赛获教师组一等奖，幼儿组一等奖，是年被评为州级先进单位；2005年被州妇联授予“巾帼文明示范岗”称号；2006年参加全州首届幼儿双语比赛获二等奖；2007年在全县举行的多彩贵州舞蹈比赛和树新风扬正气及反腐倡廉戏剧小品比赛中分别获二等奖和一等奖，“六一”节文艺演出有两个节目分别获一等奖和二等奖。
三穗县示范幼儿园在构建和谐校园中，以“一切为了孩子、为了孩子的一切”为宗旨，正在营造孩子健康成长的良好环境。